微分干涉顯微鏡(DIC顯微鏡)是一種基于偏振光干涉原理的高分辨率光學(xué)顯微鏡,能夠通過光程差將樣品表面形貌或內(nèi)部結(jié)構(gòu)的微小差異轉(zhuǎn)化為明暗對比,實(shí)現(xiàn)未染色樣品的立體成像。微分干涉顯微鏡,簡稱DIC,是顯微成像技術(shù)中的一種重要方法。DIC技術(shù)分為透射DIC和落射DIC兩種類型,分別適用于觀察水生物等透明樣品和電路板等樣品。相較于相差顯微鏡,DIC在生物領(lǐng)域的應(yīng)用中,能夠處理略厚的標(biāo)本,同時(shí)展現(xiàn)出更好的立體感和細(xì)節(jié)。
微分干涉顯微鏡適用于觀察透明的活體細(xì)胞或經(jīng)過透明化處理的樣品,它能夠揭示活細(xì)胞中較大的細(xì)胞器,如細(xì)胞核和線粒體等。若配備錄像裝置,還能記錄活細(xì)胞中顆粒和細(xì)胞器的運(yùn)動(dòng)情況。由于其好的立體感,這種顯微鏡在顯微操作領(lǐng)域有很大用途,如基因注入、核移植和轉(zhuǎn)基因等操作常在此類顯微鏡下進(jìn)行。
微分干涉顯微鏡憑借其良好的偏振光干涉原理,在生命科學(xué)、材料科學(xué)和工業(yè)檢測領(lǐng)域展現(xiàn)出重要的價(jià)值。其高分辨率、立體成像和無損檢測能力,為科研人員提供了深入探究微觀世界的工具。隨著技術(shù)不斷進(jìn)步,DIC顯微鏡將向智能化、多功能化和便攜化方向發(fā)展,進(jìn)一步推動(dòng)科學(xué)研究和工業(yè)制造的進(jìn)步。
操作流程
偏振器校準(zhǔn):旋轉(zhuǎn)起偏器至90度,調(diào)整檢偏器角度至全場消光,確保兩偏振片正交。
模式切換:插入 DIC棱鏡組件 ,微調(diào)旋鈕使兩棱鏡共軛,目鏡呈現(xiàn)紫紅色背景。
補(bǔ)償器調(diào)節(jié):觀察標(biāo)準(zhǔn)光柵片,通過補(bǔ)償器旋鈕調(diào)整至清晰黑白條紋(間距2-3個(gè)視場)。
動(dòng)態(tài)觀察:活細(xì)胞觀測需連接恒溫控制器維持37±0.5℃,使用20×物鏡時(shí)保持透鏡與培養(yǎng)皿間距≥0.5mm,啟用電子防抖功能。